• Главная
• Новое
• Популярное
• Поиск
• Карта
• Связь

Материалы и методы исследования

Экспериментальная генетика и физиология / Роль изоферментов лактатдегидрогеназы в адаптациях млекопитающих Карелии / Материалы и методы исследования

Объектами изучения являлись пушные звери клеточного содержания: американская норка (Mustela vison L.) — 6 экз., песец {Aiopex iagopus) — 17, лисица (Vuipes vuPpes L.) — 10 экз., а также млекопитающие, добытые в природе: куница лесная (Martes martes L.) — 2 экз., лось (Aices aices L.) — 9, европейский бобр (Castor fiber L.) — 9, канадский бобр (Castor Canadensis Kuhi) — 3, заяц-беляк (Lepus timidus L.) — 3, рыжая полевка (Ciethrionomyss giareoius Schreb.) — 3 экз. Норки, песцы и лисицы были выращены в зверохозяйстве ЗАО «Пряжинское». Органы остальных видов млекопитающих, добытых в природе на территории Карелии, были любезно предоставлены сотрудниками лаборатории зоологии Института биологии КарНЦ РАН.

Образцы тканей сердца, почек, легких, селезенки, печени и скелетной мышцы исследуемых животных до проведения биохимического анализа хранили в низкотемпературной камере (t°=-25°C). Для исследования изоферментного спектра ЛДГ гомогенаты тканей готовили на 0,05 М фосфатном буфере (рН=7,0). После центрифугирования при 6000g в течение 15 мин. в супернатантах проводили разделение изоферментов ЛДГ методом горизонтального энзимэ-лектрофореза на пластинках агарового геля с последующим окрашиванием и сканированием фореграмм (Кожевникова и др., 2000). Содержание каждого изофермента выражали в процентах от общей ферментативной активности.

Результаты были обработаны общепринятыми методами вариационной статистики (Ивантер, Коросов, 2003). Оценку достоверности различий проводили с помощью непараметрического критерия Вилкоксона-Манна-Уитни с использованием компьютерной программы Statgrafics 2.0 for Windows.